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T4 DNA Ligase   T4噬菌體DNA連接酶

產(chǎn)品編號        規(guī) 格        價 格
T8400-100       100u       535.00

說明：T4噬菌體DNA連接酶主要催化兩條DNA鏈上相鄰的5’磷酸基和3’-Qiang基之間形成磷酸二酯鍵。它的主要用途是連接帶匹配粘端的DNA分子，或使平端的雙鏈DNA分子互相連接或與合成接頭相連接。也可催化DNA與RNA之間以及少數(shù)RNA之間的連接，但不能催化單鏈DNA之間的連接。

單位定義：0.01Weiss單位的T4 DNA連接酶可以在16℃下反應20分鐘，連接95％的1μgλDNA-HindⅢ的分解物。

注意：一個Weiss單位的T4 DNA連接酶相當于核酸外切酶測定中的0.2單位或60個粘性末端(New England Biolabs)

存儲緩沖液：10mM Tris-HCl(pH7.5 25℃),50mM KCl，

1mM DTT，0.1mM EDTA和50％glycerol。

10×反應緩沖液：300mM Tris-HCl(pH7.8 25℃),

100mM MgCl2，100mM DTT，10mM ATP

質量控制：

1 活性：大于3Weiss單位/微升。

2 藍白克隆鑒定：12Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經(jīng)內切酶酶切產(chǎn)生的5’或3’粘性末端DNA在4℃下，反應16小時后轉化到大腸桿菌JM109培養(yǎng)，白色菌落小于總菌落數(shù)的2％；12 Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經(jīng)內切酶酶切產(chǎn)生的鈍性末端DNA在4℃下，反應16小時后轉化到大腸桿菌JM109培養(yǎng)，白色菌落小于總菌落數(shù)的5％。

3 核酸內切酶測定：20Weiss單位酶與1μg超螺旋質粒DNA在37℃下反應16小時，DNA的電泳圖譜不發(fā)生變化。

4 單鏈和雙鏈DNase測定：20Weiss單位酶與50ng同位素標記的單鏈或雙鏈DNA反應16小時，單鏈DNA的釋放量小于2％，雙鏈DNA的釋放量小于1％。

5 RNase測定：37℃時，20Weiss單位酶與50ng 3H-RNA保溫5小時，釋放量小于1％。

6 蛋白純度：SDS PAGE 檢測純度≥90％。

儲存條件：−20℃

From Promega M1801S

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